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微生物李斯特菌檢測板
更新時間：2018-01-10
訪問次數：1147
微生物李斯特菌檢測板檢測的李斯特菌包括單核細胞增生李斯特菌（Listeria.monocytogenes ），英諾克李斯特菌（Listeria.innocua），威氏李斯特菌（Listeria.welshi），但不能區分各種菌。
| 品牌 | 聚創環保 | 價格區間 | 面議 |
|---|---|---|---|
| 產地類別 | 國產 |
一、微生物李斯特菌檢測板產品介紹
1、微生物李斯特菌檢測板原理及適用范圍
李斯特菌檢測板是一種預先制備好的一次性培養基產品，含有標準的營養培養基，選擇性試劑，冷水可溶性吸水凝膠和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的顯色底物( X-GLU )，適用于檢測或者計數食品及環境樣品中的李斯特菌菌數。李斯特菌檢測板檢測的李斯特菌包括單核細胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes )，英諾克李斯特菌(Listeria.innocua)，威氏李斯特菌(Listeria.welshi)，但不能區分各種菌。
2、操作方法
2.1 食品樣品檢測
2.1.1 食品樣品處理：取樣品25 g(mL)放入裝有225 mL滅菌磷酸鹽緩沖液（或生理鹽水）的取樣罐或均質袋內，制成1:10的樣品勻液。根據樣品污染程度及檢驗需要，可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液，選擇2～3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液）來進行接種。
2.2 環境樣品檢測
2.2.1 環境樣品采集：用無菌的涂抹棒或其他采樣設備收集環境樣品。濕潤采樣設備液體體積≤10 mL。濕潤劑可以為無菌水，滅菌生理鹽水（磷酸鹽緩沖液）或者緩沖蛋白胨水。
2.2.2 環境樣品處理：在收集的環境樣品中添加10 mL 滅菌生理鹽水（或磷酸鹽緩沖液），充分混勻。根據樣品污染程度及檢驗需要，可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液，選擇2～3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液）來進行接種。
2.3 接種：將李斯特菌檢測板上層膜不干膠標簽部分揭開，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液均勻滴加到紙片上，迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板，靜置10 s左右，待樣品勻液被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩個檢測板作為重復。
2.4 培養：將檢測板疊在一起，倒置于36℃±1℃恒溫培養箱內，培養18～24h。
3、結果判讀
在檢(jian)測板上生長(chang)的(de)藍綠色(se)點(dian)即為(wei)(wei)李(li)斯特(te)菌陽(yang)性點(dian)，若檢(jian)測板上無菌生長(chang)或者長(chang)出點(dian)為(wei)(wei)其他顏色(se)點(dian)即為(wei)(wei)李(li)斯特(te)菌陰性。
4、計數原則及報告方式
4.1 樣品計數
4.1.1 以生長有30～300CFU的檢測板為計(ji)數適宜范(fan)圍。
4.1.2 若只有(you)一個(ge)稀(xi)釋(shi)(shi)度檢測板上的菌(jun)落(luo)數(shu)在計(ji)數(shu)合適(shi)范(fan)圍30～300CFU之(zhi)間，則計(ji)算兩個(ge)檢測板菌(jun)落(luo)數(shu)的平均(jun)值(zhi)，再除以相應的稀(xi)釋(shi)(shi)倍數(shu)，作為(wei)每(mei)克（毫升(sheng)）中菌(jun)落(luo)總數(shu)結(jie)果(guo)。
4.1.3 若有兩個連續稀釋度在適宜計數范圍內時，按(an)式(shi)（1）計算：
∑C
N= ———————— •••••••••••••••••••（1）
（n1+0.1n2）d
式中：
N——樣品(pin)中李(li)斯特菌(jun)菌(jun)落數；
∑C——兩個連續稀(xi)釋度檢(jian)測(ce)板（含(han)適宜范(fan)圍菌落(luo)數(shu)的檢(jian)測(ce)板）李斯特菌落(luo)數(shu)之和；
n1——適宜范圍菌落數的*個稀釋度（低）檢測(ce)板個數；
n2——適宜范(fan)圍(wei)菌落數的第二(er)個(ge)稀(xi)釋(shi)度（高）檢(jian)測板個(ge)數；
d——*稀釋度的稀釋倍(bei)數
示例：
稀(xi)釋度 | 1:10（*個稀(xi)釋度） | 1:100（第(di)二個(ge)稀釋度） |
菌(jun)落(luo)數(shu) | 245，247 | 31，30 |
（245+247+31+30）
N= ———————— =2514
（2+0.1×2）×10-1
結(jie)果表述(shu)為2.5×103CFU/g(mL)。
4.1.4 若所有稀(xi)釋(shi)度檢測板(ban)上(shang)均無菌落生(sheng)長(chang)，則以小于(yu)1/d（d—*低稀(xi)釋(shi)倍(bei)數）計算。
4.1.5 低數(shu)值的(de)估算：如果實驗樣品(pin)原(yuan)液(ye)（水及液(ye)體(ti)飲料）或初始稀釋懸液(ye)（其他樣品(pin)）的(de)兩(liang)個檢測(ce)板(ban)上(shang)的(de)菌(jun)落數(shu)均小(xiao)于30CFU，計算兩(liang)個檢測(ce)板(ban)上(shang)的(de)菌(jun)落數(shu)的(de)平均數(shu)。計算式（2）：
; ∑C
NE = —— •••••••••••••••••••（2）
nd
式中：
NE——每毫升或每克樣品(pin)中菌數的估算(suan)值；
∑C——兩(liang)個(ge)檢測板上(shang)菌落數(shu)的和(he)；
n——檢測(ce)板的數量；
d——樣(yang)品(pin)初始懸液(ye)或實(shi)際(ji)接種懸液(ye)的稀釋倍數。
4.1.6 大數值的估(gu)算(suan)(suan)：若所有稀釋度的檢測板(ban)上菌落數均(jun)(jun)大于(yu)300CFU，計(ji)數接近300CFU的檢測板(ban)上的菌落并計(ji)算(suan)(suan)出平(ping)均(jun)(jun)數，其他檢測板(ban)可(ke)記錄(lu)為多不可(ke)計(ji)。結果計(ji)算(suan)(suan)式（3）：
∑C
NE = —— •••••••••••••••••••（3）
nd
式中：
NE——每毫升或每克(ke)樣品(pin)中菌數的估算值(zhi)；
∑C——兩個檢測(ce)板上菌落(luo)數之和(he)；
n——檢測(ce)板的數(shu)量；
d——與(yu)樣品懸液(ye)相*的稀釋倍數。
5、結果報告
固體樣(yang)品以(yi)CFU/g為單位(wei)(wei)報告(gao)，液體樣(yang)品以(yi)CFU/mL為單位(wei)(wei)報告(gao)。
6、附加說明
注(zhu)意使用過的檢測板(ban)上帶有活菌，需(xu)及時按照生物安(an)全(quan)廢棄物處理(li)原則進行(xing)處理(li)。