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糞鏈球菌檢測板
更新時間:2018-01-10
訪問次數:1074
糞鏈球菌檢測板是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有標準的營養培養基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測板上呈紅色帶黃暈斑點
品牌聚創環保價格區間面議
產地類別國產

一、產品介紹
1、原理及適用范圍
糞鏈球菌普遍存在于水環境中,為條件致病菌,它來源于人和溫血動物的糞便,可以在水中存活很長時間,引起人類疾病。是水體受到糞便污染的重要指標菌,更能客觀的反映水質衛生狀況。中華人民共和國城鎮建設標準在對城市供水、飲用水水質監測中增加了水中糞鏈球菌的檢測指標。糞鏈球菌檢測板是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有標準的營養培養基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測板上呈紅色帶黃暈斑點。本產品適合于生活飲用水、生產加工用水及食品中糞鏈球菌的測定。                 
執行標準:中華人民共和國國家標準《飲用天然礦泉水檢驗方法》(GB/T 8538);中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準《出口商品中糞鏈球菌群檢驗》(SN/T 0475)。 
2、操作方法
2.1水樣品檢測
2.1.1 水樣過濾:將滅菌的過濾裝置連接到抽濾瓶上,用滅菌鑷子夾取直徑47 mm~50 mm,孔徑為0.45μm的滅菌濾膜,放在濾器底部,旋緊蓋子,將250 mL水樣注入濾器中抽濾。
2.1.2  揭開檢測板上層膜,在檢測板紙片上加1 mL無菌水濕潤后,迅速用無菌鑷子將過濾水樣的濾膜移放在檢測板紙片上(濾膜截留細菌面向上),濾膜與紙片之間不要夾留著氣泡,貼好上層膜。
2.2食品樣品檢測
2.2.1  取25 g(或25 mL)樣品放入裝有225 mL生理鹽水的均質袋中,以8000 r/min均質1~2 min,制成1:10樣品均液,根據樣品污染程度及檢驗需要,可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液。
2.2.2 將糞鏈球菌檢測板上層膜不干膠標簽部分揭開,用無菌吸管吸取1 mL樣品稀釋液均勻滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,靜置10 s左右,待樣品稀釋液被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩個檢測板作為重復。
2.3 培養:將檢測板疊在一起,倒置于恒溫培養箱內,36℃±1℃,培養15~24 h。
3、結果判讀
在檢測板(濾膜)上生長的紅色帶黃暈的斑點即為糞鏈球菌陽性,若紙片上的紅色斑點無黃暈則為糞鏈球菌陰性。

4、計數原則及報告方式
4.1  濾膜過濾水樣:以濾過一張無菌濾膜后產生的菌落數計算,選擇菌落數在20~100CFU的檢測板進行計數后即為250 mL水樣品中所含的菌落總數。結果以CFU/250 mL為單位報告。
4.2 食品樣品計數
4.2.1 以生長有30~300CFU的檢測板為計數適宜范圍。
4.2.2 若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數在計數合適范圍30~300CFU之間,則計算兩個檢測板菌落數的平均值,再除以相應的稀釋倍數,作為每克(毫升)中菌落總數結果。
4.2.3 若有兩個連續稀釋度在適宜計數范圍內時,按式(1)計算:
                        ∑C
               N= ————————     •••••••••••••••••••(1)
                   (n1+0.1n2)d
   式中:
   N——樣品中糞鏈球菌菌落數;
   ∑C——兩個連續稀釋度檢測板(含適宜范圍菌落數的檢測板)糞鏈球菌菌落之和;
   n1——適宜范圍菌落數的*個稀釋度(低)檢測板個數
   n2——適宜范圍菌落數的第二個稀釋度(高)檢測板個數
   d——*稀釋度的稀釋倍數
 示例:

稀釋度

1:10(*個稀釋(shi)度)

1:100(第(di)二個稀(xi)釋度)

菌(jun)落(luo)數

245,247

31,30

 
         ;          (245+247+31+30)
               N= —————————— =2514
                  (2+0.1×2)×10-1
結果表(biao)述(shu)為2.5×103CFU/g(ml)。
4.2.4 若所有稀(xi)釋度檢測板上均(jun)無菌落生長,則(ze)以小(xiao)于1/d(d—*低稀(xi)釋倍數)計算(suan)。
4.2.5低(di)數值的(de)(de)估(gu)算:如果實驗(yan)樣品原液(水(shui)及液體飲料)或初始稀釋懸(xuan)液(其他樣品)的(de)(de)兩個檢測板上的(de)(de)菌落(luo)數均小于30CFU,計(ji)算兩個檢測板上的(de)(de)菌落(luo)數的(de)(de)平(ping)均數。計(ji)算式(2):
 ;                   ∑C
                  NE = ——    •••••••••••••••••••(2)
                        nd
式中:
NE——每毫升(sheng)或每克樣(yang)品中菌數(shu)的估算值(zhi);
∑C——兩(liang)個檢(jian)測板上(shang)菌落(luo)數的和;
n——檢測板的數(shu)量;
d——樣(yang)品初始懸(xuan)液或實際接種(zhong)懸(xuan)液的稀釋(shi)倍數(shu)。
4.2.6大(da)數(shu)值的(de)估算(suan):若所(suo)有稀釋(shi)度的(de)檢測板(ban)上(shang)菌落(luo)數(shu)均大(da)于300CFU,計數(shu)*接(jie)近300CFU的(de)檢測板(ban)上(shang)的(de)菌落(luo)并(bing)計算(suan)出平均數(shu),其他檢測板(ban)可(ke)記錄為(wei)多(duo)不可(ke)計。結(jie)果計算(suan)式(3):
                        ∑C
                  NE = ——   •••••••••••••••••••(3)
                        nd
式中:
NE——每毫升或每克樣品中(zhong)菌數的估算值;
∑C——兩個(ge)檢測板上菌落數之和;
n——檢(jian)測板的數(shu)量;
d——與(yu)樣品懸液相*的稀(xi)釋倍數。
5、結果報告
固(gu)體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告。
6、附加說明
注(zhu)意使(shi)用過(guo)的檢(jian)測板上帶有活菌(jun),需及(ji)時(shi)按(an)照生(sheng)物安全廢(fei)棄物處理(li)原(yuan)則進行(xing)處理(li)。

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